梯度液相色譜儀是一款新型的液相色譜儀,梯度系統(tǒng)的應用范圍比等度系統(tǒng)更廣,等度系統(tǒng)不能很好分離的物質,使用梯度程序便能迎刃而解,可設定自動清洗程序而不需手動更換流動相,使色譜柱的清洗更方便,廣泛用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領域。
梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。氣相色譜中為改善對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,廣泛采用程序升溫的方法。而在液相色譜中則采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫原理是流動相由幾種不同極性的溶劑組成,通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性,使每個流出的組分都有合適的容量因子k,并使樣品種的所有組分可在最短時間內實現(xiàn)最佳分離。
梯度洗脫可提高柱效,改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最后一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時,使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩(wěn)定,必須使用恒流泵,否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
梯度液相色譜儀洗脫應滿足以下要求:
1.洗脫液體積應足夠大,一般要幾十倍于床體積,從而使分離的各峰不致于太擁擠。
2.梯度的上限要足夠高,使緊密吸附的物質能被洗脫下來。
3.梯度不要上升太快,要恰好使移動的區(qū)帶在快到柱末端時達到解吸狀態(tài)。
目的物的過早解吸,會引起區(qū)帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。